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生物分析色譜柱實(shí)驗(yàn)中易發(fā)生降解,原因幾何?

更新時(shí)間:2019-05-27瀏覽:2399次
   生物分析色譜柱實(shí)驗(yàn)中易發(fā)生降解,原因幾何?
 
  某些補(bǔ)充氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品在HCl中易發(fā)生降解,特別是谷氨酰胺和天冬酰胺,正因?yàn)槿绱耍酝ǔJ褂萌ルx子水進(jìn)行配制,也就是說標(biāo)準(zhǔn)配制方法不同。正確做法是將補(bǔ)充氨基酸溶解于去離子水中,如果將它們與其他氨基酸混合使用,則需要注意它們?nèi)芙庥谙←}酸中,因此需要快速使用。
 
  此外,還注意到其他氨基酸將在酸水解條件下發(fā)生降解。其中包括色氨酸和4-羥基脯氨酸。然而,它們的降解機(jī)理不同。
 
  請注意兩種氨基酸中的酰胺基團(tuán)。當(dāng)這些基團(tuán)暴露在酸中時(shí),將水解釋放出氨。
 
  那么機(jī)理的來源究竟是什么呢?
 
  由于質(zhì)子H+首先進(jìn)攻酰胺的羰基氧O開始,然后經(jīng)過水合以及脫氨NH3,完成整個水解過程。經(jīng)過水解,原本的酰胺變成羧酸和游離的氨。
 
  總之,分析的癥結(jié)就是在于補(bǔ)充氨基酸不穩(wěn)定容易在酸中水解,如果您正在從事相關(guān)的實(shí)驗(yàn),一定要注意樣品前處理不要犯錯哦。
 
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  生物分析色譜柱到底能不能反沖?如果色譜柱兩端的篩板孔徑相同反沖是不會有什么問題的,從填料流失的角度來說,粒徑為5um,而篩板孔徑為2um,這種情況下正沖反沖都不會造成填料的流失;此外,從柱子裝填的角度來說,裝柱時(shí)是按照與柱身箭頭相反的方向裝填的,與反沖時(shí)的液體流路方向相同。
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